Sabtu, 11 Januari 2014

Identification of the Major Ubiquitin-binding Domain of the Pseudomonas aeruginosa ExoU A2 Phospholipase

By :
abstrak
Banyak Gram -negatif bakteri patogen menggunakan tipe III sistem sekresi untuk memberikan molekul efektor ke dalam sitoplasma sel inang . Banyak dari efektor ini telah berevolusi untuk memanipulasi sistem host ubiquitin untuk mengubah fisiologi sel inang atau lokasi , stabilitas , atau fungsi efektor itu sendiri . ExoU adalah A2 fosfolipase ampuh digunakan oleh Pseudomonas aeruginosa untuk menghancurkan membran sel yang terinfeksi . Enzim ini diadakan dalam keadaan tidak aktif dalam bakteri karena tidak adanya aktivator eukariotik diperlukan, yang baru-baru ini diidentifikasi sebagai ubiquitin . Penelitian ini berusaha untuk mengidentifikasi wilayah ExoU diperlukan untuk menengahi interaksi ini dan menentukan sifat-sifat ubiquitin penting untuk mengikat , ExoU aktivasi , atau keduanya . Pendekatan biokimia dan biofisik digunakan untuk memetakan domain ubiquitin - mengikat empat - helix bundel C - terminal dari ExoU . Patch hidrofobik ubiquitin diperlukan untuk afinitas mengikat penuh dan aktivasi . Binding dan aktivasi yang uncoupled dengan memperkenalkan substitusi L8R di ubiquitin . Dimurnikan L8R menunjukkan fenotipe mengikat orangtua untuk ExoU tetapi tidak mengaktifkan fosfolipase in vitro . Memanfaatkan data ini biokimia baru dan pengukuran jarak antarmolekul oleh resonansi ganda elektron - elektron , kami mengusulkan model untuk sebuah kompleks ExoU - monoubiquitin .

Tidak ada komentar:

Posting Komentar